ULaval:MED-1222/Sang normal et molécule d'hémoglobine

Ce guide d'étude est tiré des notes du cours d'hématologie (MED-1222), écrites par François Jobin, Pierre F. Leblond, Vincent Bernier, Robert Delage, Vincent Larouche, Wiener Audoin, Stéphanie Cloutier et Christine Demers, ainsi que des ressources fournies dans ce cours.

Le sang est un tissu fluide visqueux qui est constitué de nombreuses cellules contenues en suspension dans un liquide complexe, le plasma. Il s'agit d'un tissu qui a le pouvoir de circuler car les cellules sanguines sont toutes dissociées les unes des autres à l'état normal (contrairement aux autres tissus) et elles ont une plasticité remarquable. La viscosité du sang est fonction de plusieurs paramètres, soit (1) l'hématocrite (2) la déformabilité érythrocytaire (3) la viscosité du plasma sanguin (4) les paramètres circulaires tel que le diamètre des vaisseaux sanguins, la vitesse de cisaillement, les propriétés du flot sanguin (laminaire ou turbulent).

C'est l'hémoglobine, le pigment respiratoire trouvé en grande quantité dans les érythrocytes (= globule rouge (GR)), qui est responsable de la couleur rouge du sang.

Fonctions du sang

Fonctions générales	Fonctions spécifiques
·  Transport : Avec ou sans véhicule sanguin ·  Communication	·  Transport de l’O2 et du CO2 ·  Défense contre l’étranger ·  Hémostase ·  Préservation de la fluidité

Fonctions générales

Le sang est responsable du transport de :

• Énergie :  O₂, CO₂, Chaleur, molécules énergétiques
• Substances nutritives : Minéraux, vitamines, acides aminés, glucides, lipides…
• Déchets : Résultant de la combustion et des métabolismes (ex : Urée, Ammoniac…)
  • Ils sont dirigés vers les organes émonctoires : Reins, Foie, Poumons
• Hormones, amines biogènes et substances apparentés : Permette la régulation des interrelations complexes existant entre les divers organes et fonctions physiologique, soit une « communication » de l’organisme par le sang.

Plusieurs des composantes transportées par le sang mentionnées ci-dessus sont véhiculé dans le sang par l’intermédiaire de protéines de transport qui sont spécifique ou non. Un exemple de véhicule sanguin est l'albumine.

Fonctions spécifiques

Transport de l’O₂ et du CO₂

C’est la fonction essentielle du GR qui transporte l’O₂ des poumons au tissu et ramène aux poumons une partie du CO₂ via l’hémoglobine, le constituant essentiel du GR. Certaines propriétés déterminantes des GR sont responsables d'assurer le transport de ces deux molécules, soit:

1. Appareil enzymatique réducteur capable de lutter contre l’oxydation irréversible du fer hémoglobinique
   1. Permet d'assurer le maintien de l’état fonctionnel de l’hémoglobine => Soit permettre la libération de l’O₂ au niveau des tissus
2. Maintien d’une grande déformabilité du corpuscule érythrocytaire
   1. Permet aux GR de pouvoir cheminer à travers les capillaires, qui l’obligent à se glisser dans des pertuis ayant à peine 3µm de diamètre

Défense contre l’étranger

La défense de l'organisme contre l'étranger est assumer par plusieurs mécanismes en concertation :

• Surveillance immunitaire
  • Exercé par les lymphocytes qui ont la capacité de reconnaître le « non soi »
    • Ils patrouillent le sang, la lymphe, les vaisseaux lymphatiques et les organes lymphoïdes

• Immunité cellulaire
  • Production d’une part de lymphocytes sensibilisés et destructeurs et d’autre part de lymphocytes-mémoire qui conservent le souvenir de cette agression antigénique
• Immunité humorale
  • Production d’immunoglobulines (anticorps) dont l’action est complétée par un système complexe de protéines plasmatiques, le complément hémolytique
• Phagocytose
  • Permets aux autres composantes de mener leur action jusqu’à son terme ultime
  • Plusieurs types de cellules sont phagocytaires dont :
    • Certains polynucléaires + Monocytes (Au niveau du sang)
    • Histiocytes/Macrophages (Au niveau des tissus)
    • Certaines cellules endothéliales

Hémostase

Mécanisme sanguin par lequel l’organisme arrête l’hémorragie par l'intermédiaire de deux composantes, (1) les plaquettes (2) le système de coagulation plasmatique

Préservation de la fluidité

Celle-ci est rendue possible grâce à :

• La capacité de déformabilité des cellules sanguines : Principalement celle des érythrocytes étant donné leur grande importance quantitative
• La présence de protéines anticoagulantes : Présente dans le plasma, elles empêchent la formation de caillot
• La présence du système de la fibrinolyse : Permet de dissoudre les caillots s’ils se forment

Provenance des éléments sanguins

** Se référer à la section sur l’hématopoïèse (chapitre 4) pour plus de détail

Éléments sanguins	Principal lieu de synthèse	Commentaires
Protéines plasmatiques	Foie	Certains sont synthétisé en tout ou en partie par les histiocytes ou les cellules endothéliales. Quatre protéines de coagulation ont besoin de la vit. K
Immunoglobulines	Lymphocytes & Plasmocytes
Lymphocytes	Organes lymphoïdes périphériques	Une fois la « puberté » immunologique passée (avant = au niveau de la moelle par le précurseur multipotent lymphoïde)
Autres cellules sanguines	Moelle osseuse (Hématopoïèse)	Deux vitamines essentielles : Vit. B12 & Acide folique Lignée des GR, elle a besoin de : Fer & Pyridoxine (B6)

C’est au niveau de la moelle osseuse que la majorité des cellules sanguines sont produites (hématopoïèse). Les organes lymphoïdes, soit les ganglions, le thymus et la rate ont un rôle important chez l'adulte pour la production des lymphocytes (lymphopoïèse)

Le métabolisme des quatre vitamines (K, B₆, B₁₂, acide folique) et celui du fer sont d'une grande importance en hématologie.

Volume sanguin et hématocrite

Permet l'étude quantitative des éléments sanguins.

Centrifugation du sang Les érythrocytes + leucocytes + plaquettes constituent les éléments figurées du sang (ou globules)

Le volume sanguin est composé du volume plasmatique et du volume des éléments figurés du sang (cellules sanguines), lequel est nommé volume globulaire. Ce dernier correspond essentiellement au volume érythrocytaire étant donné que ceux-ci constituent environ 99% des cellules sanguines).

Les mesures sanguins peuvent être absolues (les volumes exactes) ou relatives (les proportions). Les mesures relatives sont plus facilement obtenues par l'intermédiaire d'un échantillon sanguin. On retrouve deux mesures relatives de la masse sanguine, l'hématocrite et le plasmacrite. L'hématocrite correspond au pourcentage du volume sanguin occupé par les éléments figurés du sang (GR, leucocytes et plaquettes). Le plasmacrite correspond au pourcentage de volume sanguin occupé par le plasma. Ces deux mesures peuvent être obtenue par centrifugation d'un petit volume de sang, provenant des veines ou des capillaires, anticoagulé et mis dans un tube gradué. La centrifugation permet la séparation du plasma (qui se retrouve au dessus) et des éléments figurés du sang (qui se retrouvent au fond). Il est donc par la suite possible d'apprécier le pourcentage du volume total qui est occupé par les éléments figurés (hématocrite) et le plasma (plasmacrite).

Voici quelques formules permettant de quantifier les éléments sanguins :

Hématocrite = Volume de la colonne des éléments figurés ÷ Volume total de sang centrifugé

Plasmacrite = Volume de la colonne de plasma ÷ Volume total de sang centrifugé

Volume sanguin total = Volume globulaire + Volume plasmatique = Volume globulaire ÷ Hématocrite = Volume plasmatique ÷ Plasmacrite

Afin de pouvoir trouver le volume sanguin total, il faut connaître non seulement une mesure relative mais il faut aussi un volume. Heureusement, il est possible de mesurer le volume globulaire par l'intermédiaire d'une étude de la dilution dans le sang circulant d'une substance étrangère injectée et facilement identifiable, tel qu'un radio-isotope fixé à l'albumine humaine ou à des érythrocytes. Par exemple, lorsqu’on injecte des GR marqués avec le Chrome⁵¹, on obtient une mesure directe du volume des éléments figurés. Ainsi, il est possible d'appliquer le formule ci-dessus approprié pour trouvé le volume sanguin ainsi que le volume plasmatique.

Valeurs normales du volume sanguin totale, du volume des éléments figurés et du volume plasmatique

Elles varient, à l’état normal, en fonction de plusieurs éléments, dont le poids, la taille, le sexe et l'âge. Voici les valeurs normales selon le sexe.

	Volumes (ml/Kg)
	Plasmatique	Globulaire	Sanguin total	Hématocrite
Homme	41 ± 3	30 ± 2	71 ± 5	0,47 ± 0,05
Femme	41 ± 3	25 ± 2	66 ± 5	0,42 ± 0,05

Le plasma

C'est une solution aqueuse très riche en protéines et contenant également d’autres macromolécules, des sels minéraux et de nombreuses molécules organiques de petite taille (micromolécules). La protéinémie normale du plasma varie entre 60 et 80 g/L et 50% de celle-ci est attribuable à l'albumine. La pression oncotique du plasma étant directement proportionnelle à sa teneur en protéine, la concentration d'albumine est donc déterminante.

Fonctions

Générales

1)    Transport des cellules sanguines maintenus en suspension, dissociées les unes des autres, en équilibre fragile

2)    Véhicule non spécifique (par l’albumine notamment), pour le transport de plusieurs micromolécules endogènes ou exogènes

Spécifiques

Les rôles spécifiques du plasma sont remplies grâce aux protéines plasmatique que ce dernier transporte

Rôles spécifiques	Protéines plasmatiques impliquées	Commentaires
Hématopoïèse	Protéines de transport : -        Transcobalamine II (B12) -        Transferrine (Fer) Protéines de stockage : -        Ferritine (Fer) Protéines de régulation : -        Érythropoïétine -        Thrombopoïétine
Immunité humorale	Anticorps (Immunoglobulines) : -        IgG, IgA, IgM, IgD, IgE Système du complément Opsonines	Les opsonines favorisent la reconnaissance pour la phagocytose ð  Les Ac et le complément ont des propriétés opsonisantes Ces protéines de défense agissent en concertation avec les phagocytes circulants ou fixes et les lymphocytes
Hémostase et Fibrinolyse	Système de coagulation Cofacteurs de l'hémostase primaire Fibrinolyse	Ces protéines agissent de concert avec les plaquettes sanguines et la paroi des vaisseaux sanguins
Action inhibitrice	Protéines Anticoagulantes Protéines anticomplémentaires Protéines Antifibrinolytiques	Les protéines inhibitrices circonscrivent et contrôlent l’ampleur des réactions de défense du sang

D'autres protéines plasmatiques sont importantes en hématologie, dont le système de kinines et l'haptoglobine entre autres.

Étude qualitative et quantitative des protéines plasmatiques

D'un échantillon sanguin, il est possible d'obtenir le sérum, soit la phase liquide résiduelle lorsque le plasma coagule dans l’éprouvette (le précipité étant le fibrinogène transformé en un caillot de fibrine). Le sang entier tout comme le sérum peuvent être utile pour des analyses quantitatives et qualitatives.

Les méthodes d'analyse globale des protéines plasmatiques comprennent les éléments suivants :

• Électrophorèse des protéines
• Immunofixatio des protéines au besoin
• Dosage du fibrinogène plasmatique
• Dosage quantitatif des immunoglobulines G, A et M

Une autre méthode d'application globale et de dépistage facile des perturbations des protéines plasmatique est la vitesse de sédimentation érythrocytaire.

Électrophorèse

C'est une technique pratiquée sur le sérum qui consiste en la séparation des protéines sériques en fonction de leur vitesse de migration (dans l’acétate de cellulose) lorsqu’elles sont soumises à un champ électrique. Cette technique permet de reconnaître l'albumine, les α-1-globulines, les α-2-globulines, les β-globulines et les gammaglobulines (IgG, IgA, IgE, IgD, IgM). Afin de compléter l'étude il faut donc faire un dosage du fibrinogène plasmatique.

Les fractions protéiques séparées sur le gel d'acétate de cellulose utilisé pour l'électrophorèse sont presque toutes hétérogènes (sauf l'albumine), puisqu'elles contiennent des protéines de structure et de fonctions différentes. Certaines protéines migrent également entre les fractions protéiques identifiées, mais en moindre quantité. D'autres protéines migrent dans plusieurs fractions, tel que les IgG ou IgA, car leur vitesse de migration est différente selon la structure biochimique spécifique de leur portion variable.

Concentration normale des fractions de protéines plasmatiques obtenues par électrophorèse (en g/L)

Albumine	40 - 45
Gammaglobulines	10 - 16
b-globulines	7 - 13
a-2-globuline	4,5 - 7
a-1-globuline	2 - 4

** En ajoutant la valeur du fibrinogène (2 - 4 g/L) on obtient la protéinémie totale de 60 à 80g/L

Immunofixation des protéines Ici des anticorps spécifiques ont été utilisés pour les chaînes lourdes des IgG (G), IgA (A), IGM (M), IgD (D), IgE (E) et les chaînes légères kappa (κ) et lambda (λ). La présence d'une bande foncée indique la prévalence d'une protéine par rapport à une autre, ce qui permet de reconnaître l'immunoglobuline présente dans le sérum. Par exemple, en B il s'agit d'une immunoglobuline G qui porte une seule chaîne lambda, elle est donc monoclonale.

Immunofixation des protéines

C'est une analyse plus raffinée puisqu’on ajoute une étape à l’électrophorèse, ce qui permet de reconnaître certaines protéines de façon beaucoup plus spécifique que l’électrophorèse unique. Deux principes sous-tendent l'immunofixation des protéines:

1. Séparation de sprotéines sériques en fonction de leur vitesse de migration en cellulose dans un champ électrique
2. Utilisation d’antisérums monovalents pour provoquer la précipitation de complexes formés par les antigènes des protéines plasmatiques d’une part et l’anticorps correspondant à ceux-ci d’autre part. Ceci permet de doser un antigène en particulier en fonction de l’anticorps ajouté (précipitation du complexe Ag-Ac).

Elle s'effectue comme suit : L’anticorps monovalent associé à l’antigène d’intérêt est ajouté au niveau du gel de cellulose, ce qui permet la précipitation uniquement du complexe Ag-Ac voulu. Plusieurs gels sont donc nécessaire pour bien identifier les protéines présentes. Par exemple, dans le cas des gammaglobulines, il faut faire un gel pour chacune des chaînes constantes des différentes gammaglobulines afin d’identifier le type (G, D, E, M, A), ainsi qu’un gel pour chaque possibilité de chaîne légère (kappa et lambda). Les résultats permettent ensuite d’identifier l’immunoglobuline en question.

Vitesse de sédimentation

Vitesse de sédimentation érythrocytaire

Basé sur le principe que laissé au repos, les GR ont normalement tendance à former des « rouleaux érythrocytaire » en s’empilant les uns sur les autres.

Elle se calcul comme suit :

1.    Remplir un tube de verre gradué avec du sang complet préalablement anti-coagulé et bien mélangé de façon à obtenir une colonne de liquide de 200mm de hauteur.

2.    Après 1h, on mesure la colonne de plasma (en mm) qui a été débarrassée de GR à l’extrémité supérieure de la colonne de sang

La valeur de cette colonne de plasma correspond à la vitesse de sédimentation érythrocytaire en mm/h.

Normalement, après 1h, la vitesse de sédimentation est de 2 à 12mm chez l'homme et de 2 à 20mm chez la femme.

Les cellules sanguines normales

On réfère aux cellules sanguines comme étant les éléments figurés du sang. Ceux-ci appartiennent à 3 catégories générales :

1. Globules rouges (érythrocytes ou hématies) : Population homogène de cellules anucléées
2. Globules blancs (leucocytes) : Population hétérogènes de cellules nucléées de morphologie et de fonctions différentes
   1. Lymphocytes : « Soldats qui patrouillent » (sang, lymphe, vaisseaux lymphatiques, organes lymphoïdes)
   2. Polynucléaires (granulocytes)
      1. Neutrophile
      2. Éosinophiles
      3. Basophiles
   3. Monocytes
3. Plaquettes (thrombocytes)

Étude des cellules sanguines normales

Plusieurs techniques permettent l'étude des éléments figurés du sang. Ces derniers sont donc étudier par :

1. La numération globulaire : Calculer le nombre de cellules contenues dans l’unité de volume du sang via des appareils électroniques sophistiquées
2. L'analyse de la population érythrocytaire : Via la mesure de l'hémoglobine, de l'hématocrite et du nombre de GR
3. L'examen des cellules du sang sur frottis : Appréciation des variations morphologiques individuelles (taille, forme, coloration) des cellules sanguines (surtout les GR) et permet d'établir les proportions des divers éléments leucocytaires permettant d'obtenir la leucocytose totale. Ainsi, il est possible d'identifier et d'étudier les cellules sanguines anormales.

Les deux premières méthodes d'étude sont des éléments retrouvés sur l'hémogramme. Le frottis sanguin quant à lui est effectué lorsque l'hémogramme est anormal.

Deux principes permettent de discriminer les 5 sous-types de leucocytes, permettant ainsi d'obtenir la formule leucocytaire :

1. L'impédance (Courant électrique)
   1. Classification selon la taille des cellules : Les faibles impulsions indiquant de petites cellules et les fortes impulsions indiquant de grandes cellules
2. La réfraction de la lumière
   1. Classification selon la forme et la granulosité entre autres.

Valeurs normales de la numération globulaire

Cellules	Nouveau-né	Enfant 1 ans	Femmes	Homme
Érythrocytes	4 à 6 x 1012	3,6 à 5 x 1012	4,0 à 5,4 x 1012	4,5 à 5,9 x 1012
Leucocytes	10 à 25 x 109	4 à 10 x 109
Plaquettes	160 à 400 x 109

Proportions des leucocytes sanguins

La formule leucocytaire est obtenue, avec l'hémogramme, lorsqu'une formule sanguine complète est demandée (FSC). Lors de l'analyse de celle-ci il est important de ne tenir compte que des nombres absolus de chaque catégorie de leucocytes (et non des nombres relatifs).

Les données ci-dessous valent pour l’adulte (virage de la formule leucocytaire de l'enfant à celle de l'adulte entre 4 et 8 ans). La formule leucocytaire de l’enfant est très différente. En effet, dans le premier mois de vie, une formule à prédominance lymphocytaire s’établit, avec tendance à une leucocytose totale plus élevée.

Types de leucocytes	Proportion	Nombres absolues (x109/L)
Neutrophiles	0,35 à 0,70	1,8 à 7,0
Bâtonnets ou « stabs » (précurseurs des neutrophiles)	0,01 à 0,04	0,04 à 0,25
Éosinophiles	0,01 à 0,08	0,05 à 0,7
Basophiles	0,00 à 0,015	0,01 à 0,15
Lymphocytes	0,20 à 0,50	1,5 à 4,0
Monocytes	0,03 à 0,12	0,2 à 0,95

En présence de "drapeau rouge" à l'hémogramme, l'échantillon doit être vérifié au frottis :

"Drapeau rouge" lorsque :

• Valeurs inférieures ou supérieures à la normale
• Valeurs significativement différentes des résultats antérieurs
• Taille anormale des cellules
• Anomalie dans le sérum altérant la lecture : Lipide, Bilirubine, Protéines...

Frottis sanguins

Cette méthode consiste en l'évaluation au microscope d'une goutte de sang, étendue en une couche mono cellulaire entre deux lamelles de verres, qui a été préalablement colorée par l'intermédiaire d'un colorant approprié, tel que le May-Grunwald-Giemsa.

Durée de vie des cellules sanguines

• Érythrocytes : 110-120 jours ** C'est sa capacité de déformabilité qui lui confère sa longévité
• Plaquettes : 7-10 jours
• Leucocytes : Environ 24h, varie selon le type
  • Monocytes : 2 à 3 jours
  • Neutrophiles : 6 à 15 heure

Les érythrocytes

Ils sont les principaux éléments figurés du sang. Lors de leur arrivée en circulation, suite à leur synthèse au niveau de la moelle osseuse (hématopoïèse), on les nomme réticulocytes pour les premiers 24h. Ces précurseurs des érythrocytes, sont distinguables des érythrocytes matures (> 1 jour en circulation) au frottis sanguin étant donné la présence de la substances granulo-filamenteuse, laquelle correspond aux quelques organites cytoplasmiques encore présents dont leur disparition correspondra à la dernière étape de maturation. Cette substance granulo-filamenteuse est principalement composée d'ARN ribosome impliqué dans la synthèse de l'hémoglobine. En temps normal, on retrouve de 20 à 100 x 10 ⁹ réticulocytes par litre de sang, ce qui correspond à 0,5% à 2,0% du nombre total d'érythrocytes à l'état normal. Ci-dessous les caractéristiques des érythrocytes matures seront abordées.

La principale fonction des érythrocytes est le transport de l’O₂ et du CO₂, se référer à la section fonctions spécifiques du sang pour plus de détail.

Morphologie et structure

Les érythrocytes sont des globules homogènes, ie. à l’état normal, tous les érythrocytes ont sensiblement la même forme, le même diamètre et la même coloration. En forme de disque biconcave, ils ont un diamètre ~8µm. Sous microscopie ils ont l'air circulaire.

Ce sont des cellules anucléée (ie. sans noyau) avec une membrane enveloppante. Cette dernière est sensiblement pareil aux membranes cellulaires avec un double couche phospholipidique où sincère des protéines. Autour de celle-ci on retrouve une couche additionnelle, riche en mucopolysaccharides, qui contient les substances des groupes sanguins. À l'intérieur de la double couche de phospholipides on retrouve une structure protéine qui sous-tend la membrane, laquelle est composée entre autres de spectre qui joue un rôle pour le maintien de la forme normale de l'érythrocyte ainsi que dans sa capacité à se déformer.

Le cytoplasme érythrocytaire ne contient aucun organites, ceux-ci ayant tous été expulsés au cours de la maturation de l'hématie. Il s'agit donc d'une solution aqueuse riche en hémoglobine (~ 300 millions de molécules d’hémoglobine par GR, ce qui correspond à ~ 1/3 de son poids) et contenant des enzymes et leurs cofacteurs, des sucres et des ions.

La déformabilité érythrocytaire est essentiel au bon fonctionnement des érythrocytes, afin qu'ils puissent cheminer à travers les capillaires sanguins facilement. Elle dépend de plusieurs facteurs, soit :

• La viscosité interne du cytoplasme érythrocytaire
  • En rapport étroit avec la concentration et la solubilité de l'hémoglobine intra-érythrocytaire
• Le rapport surface/volume érythrocytaire
  • Élevé en raison de la forme en disque biconcave
• La flexibilité de la membrane érythrocytaire
  • Rôle de la spectrale, du Ca²⁺ et de l’ATP

Toute modification de la plasticité remarquable des érythrocytes normaux entraîne une gêne de la circulation et peut contribuer à la destruction des hématies, particulièrement dans la rate.

Métabolisme érythrocytaire

La principale source énergétique du GR est la glycolyse anaérobie, par l'intermédiaire de la voie classique ou la voie des pentoses, complétée par un jeu d'enzymes qui ont la capacité de maintenir le pouvoir réducteur du GR. En effet, comme il ne possède plus de noyau ni d'organite, le GR ne peut pas synthétiser de nouvelles enzymes ni utiliser la chaîne respiratoire.

Les produits du métabolismes érythrocytaires sont :

• ATP : Pour le stockage de l’énergie
• 2,3-disphosphoglycérate : Régulateur de l'affinité de l'hémoglobine pour l’O₂
• NADPH et Glutathion réduit : Principales substances à pouvoir réducteur

Méthodes d'étude des GR

L'étude des anomalies des érythrocytes est particulièrement utile pour le diagnostic différentiel des anémies. Se référer à la section sur les anémies pour plus de détail.

Constantes érythrocytaires

Elles sont des paramètres moyens qui caractérisent la population érythrocytaire. Elles sont obtenues par l'intermédiaires de trois mesures, soit (1) taux d'hémoglobine en g/L dans le sang (2) hématocrite (3) Nombre d'érythrocytes par litre de sang. Le tableau ci-dessous présentes ces constantes, le moyen de les calculer ainsi que les valeurs normales de celles-ci.

Le TGMH évolue toujours en parallèle avec le VGM, il apporte donc peu d'information supplémentaire. C'est le VGM et le CGMH qui sont d'intérêt.

Examen sur frottis

Permet de visualiser les anormalités possibles des GR. Celles-ci peuvent affecter différents aspects de la morphologie des hématies dont la taille, la forme ou la coloration. D'abord, voici l'apparence normale des GR sur frottis :

• Diamètre d'environ 8µm
• Pâleur centrale = 25%, maximum 33% du diamètre total

Dans le tableau suivant, voici quelques anomalies possibles ainsi qu'une brève description de celles-ci.

Les leucocytes sanguins

Il s'agit d'une population hétérogène au point de vue morphologique et fonctionnel. Les leucocytes englobent les granulocytes (neutrophile, éosinophile et basophile), les monocytes et les lymphocytes (T, B et NK). Plusieurs classifications sont possibles :

• Selon le type de fonction de défense
  • Phagocytose : Granulocytes, Monocytes
  • Immunité cellulaire ou humorale : Lymphocytes
• Selon leur lieu d'origine
  • Médullaire : Granulocytes, monocytes
  • Lymphoïde : Lymphocytes (chez l'adulte)
• Selon la forme de leur noyau
  • Polynucléaire : Granulocytes
  • Mononucléaire : Monocytes, Lymphocytes
• Selon la présence ou non de granulation
  • Granulocytes : Granulocytes
  • Cellules non granulocytaire : Monocyte, Lymphocyte

Neutrophile

Neutrophile

D'un diamètre 8 à 12µm, il fait partie de la classe des granulocytes polynucléaires. La nomenclature de polynucléaire est mal adapté puisqu'il ne possède pas plusieurs noyaux mais bien plusieurs lobes/segments au sein d'un sel noyau. Le plus souvent son noyau est composé de 3 lobes reliés par des segments chromatines plus étroits.

Dans son cytoplasmes on retrouve des granulations de deux types :

• Primaires (car elles sont la première génération de granulation durant la maturation) = Azurophile
  • En petit nombre
  • Contiennent des protéines cationiques et plusieurs enzymes, dont la myéloperoxydase
• Secondaires
  • Granulations cytoplasmiques fines propres aux neutrophiles
  • À la coloration au May-Grunwald-Giemsa au frottis sanguin, elles sont marron ou beige
  • Neutrophiles
  • Ce sont les lysosomes primaires, qui contiennent une batterie d’enzymes hydrolytiques et d’autres substances à propriétés bactéricides ou inflammatoires

Les neutrophiles se répartissent en deux compartiments, à environs 50/50 :

1. En circulation dans le sang " Compartiment circulant "
2. Adhérent à l'endothélium vasculaire " Compartiment marginal "

Le compartiment marginal n'apparait pas lors des décomptes leucocytaires sur le sang prélevé. Toutefois, certaines circonstances, telles que des émotions intenses (stress...) peuvent mener à la démargination des neutrophiles et par conséquent causer une neutrocytose.

Propriétés des neutrophiles

Margination	Processus d’adhésion des neutrophiles à l’endothélium vasculaire (pour constituer le compartiment marginal) C'est la première étape de la migration des neutrophiles hors des vaisseaux pour exercer leur fonction de défense
Diapédèse	Capacité des neutrophiles de franchir la paroi des vaisseaux suite à un stimuli chimiotaxique afin de se rendre au niveau des réactions tissulaires inflammatoires pour combattre l’étranger.
Phagocytose Bactéricide Digestion intracellulaire	Capacité des neutrophiles à ingérer les corps étrangers (suite à la reconnaissance des opsonines) en les enrobant d’une portion de leur membrane pour ainsi former un nouvel organite intracytoplasmique. S’ensuit la destruction de la bactérie par des agents bactéricides suivit d’une digestion intracellulaire de celle-ci.

Les stimuli chimiotaxiques font référence à des substances chimiotaxiques qui ont la capacité d'attirer une cellule en particulier, laquelle se dirige vers les concentration toujours plus grande de cette substance jusqu'à y arriver. Parmi les substances chimiotaxiques, on note entre autres les produits bactériens et certaines fractions du complément activées par les réactions Ag-Ac ou via la voie alterne.

L'opsonisation correspond à la facilitation de la phagocytose par des opsonines, lesquelles sont des molécules spécifiques retrouvés à la surface des particules à phagocytés. Le phagocyte possède de son côté les récepteurs spécifiques à ces opsonines, ce qui permet une phagocytose dirigée et contrôlée. Les opsonines sont entre autres, des protéines non spécifiques relativement à l'antigène à éliminer, des IgG dirigées contre un antigène de la surface des substances étrangères ou encore la fraction C3b du complément hémolytique.

Étapes de la phagocytose

La principale fonction des neutrophiles est la phagocytose, dont les étapes sont les suivantes:

1. Phagocytose de la particule étrangère reconnu grâce aux opsonines => Création du phagosome (vésicule contenant la particule phagocytée)
2. Propriété bactéricide :
   1. Phagocyte « Activé » demande une augmentation de la consommation d’O₂, ce qui mêne à l'accumulation d’espèces réactives de l’oxygène (anion superoxyde (O₂^-), peroxyde d’hydrogène (H₂O₂)) dans le phagozome, lesquels sont très nocifs et cause l'intoxication de la bactérie ou lyse de sa membrane enveloppante menant ultimement à la mort de la bactérie.
      1. Ces espèces réactives de l'oxygène ont donc un action microbicide, laquelle est exercée seule ou en collaboration avec la myéloperoxydase
3. Digestion intracellulaire
   1. Fusion du phagosome avec les lysosomes qui sont en fait les granulations primaires et secondaires qui sont remplies d’enzymes menant à la formation du phagolysosome où aura lieu la digestion du corps étranger, on parle alors de vacuole de digestion.
4. Exocytose de l’organite résiduel

Éosinophile

Éosinophile

C'est une cellule très similaire au neutrophile, mais elle s'en distingue par certaines caractéristiques soit :

• un noyau moins lobé avec un aspect en lorgnon (« lunettes »)
• des granulations distinctives plus grosses, plus nombreuses et de teinte franchement orangée à la coloration au frottis sanguin.

Les principales propriétés et fonctions de l'éosinophile sont la mobilité, la phagocytose et les réactions immunitaires et allergiques. En effet, dans certains parasitoses et dans certaines allergies chroniques on observe une éosinocytose.

Basophile

Basophile

Le basophile est caractérisé par la présence de grosses granulations basophiles et noirâtres à la coloration de May-Grunwald-Giemsa. Celles-ci sont très nombreuses et recouvre le noyau dont la segmentation variable est souvent masquée.

Le basophile est principalement un réservoir d'histamine (active des réponses inflammatoires et allergiques) et possiblement également d'héparine. Il joue potentiellement un rôle au niveau des IgE dans les réactions allergiques, comme le mastocyte qui est un basophile tissulaire.

Monocyte

Monocyte

C’est la plus grande des cellules circulantes à l’état normal avec un diamètre d'environ 15µm. Son noyau est encoché, mais nonpolylobé, il est donc réniforme (en forme de rein) et sa chromatine est formée de fins filaments grossièrement parallèles ne constituant jamais de motte franche. Il contient quelques granulation azyrophiles très fines. Son cytoplasme est gris-bleuté à la coloration de May-Grunwald-Giemsa témoignant d'une légère basophilie.

Le monocyte fait partie d’un système complexe de cellules distribué dans de nombreux tissus. Lorsque le monocyte s’échappe du sang pour gagner les tissus, il devient histiocyte, lequel est susceptible de devenir un macrophage ou une cellule dendritique, moyennant des changements morphologiques et métaboliques fondamentaux. On nomme ce système réticulo-endothélial ou histiocytaire.

La fonction principale des monocytes est la phagocytose. Ils jouent également un rôle dans les réactions d'immunisation humorale et cellulaire comme cellule présentatrice d'antigène (macrophage ou cellule dendritique).

Lymphocytes

Petit lymphocyte

Grand lymphocyte

Ils regroupent plusieurs populations lymphocytaires fonctionnellement distinctes, soit:

• Les lymphocytes T qui jouent un rôle essentiel dans l'immunité cellulaire
• Les lymphocytes B qui joue un rôle essentiel dans l'immunité humoral (par la production d'anticorps)
• Les lymphocytes NK " Natural Killer "

On distingue les petits lymphocytes et les grands lymphocytes.

• Les petits lymphocytes sont des cellules arrondie, bien délimitée de 6 à 9 µm. Leur noyau, irrégulièrement rond et dont la chromatine est extrêmement sombre et condensée, occupe presque toute la cellule . Par conséquent le cytoplasme est très réduit, ce qui donne un rapport nucléé-cytoplasmique élevé. Le cytoplasme est généralement bleuté et sans granulation.
• Les grands lymphocytes, correspondant souvent au phénotype NK, sont de taille plus considérable avec un noyau plus volumineux et un cytoplasme plus étendu. Le cytoplasme est presque incolore et contient parfois des granulations azurophiles (rouge à la coloration de May-Grunwald-Giemsa).

Thrombocytes

Les thrombocytes, ou plaquettes, sont de très petites cellules anucléées de 1,5 à 2µm. Leur cytoplasme contient quelques organises (mitochondries et lysosomes) et quelques granulations, certaines très denses qui sont des réservoirs de stockage de substances importante pour les fonctions plaquettaires, d'autres qu'on nomme granulations alpha servent de lieu de stockage de substances sécrétantes par les plaquettes. Sur frottis, elles ont tendance à s’agglutiner spontanément sous forme de petits amas.

Ils jouent un rôle essentiel dans l'hémostase de l'organisme.

Sommaire des principales fonctions des cellules sanguines